Nicole Forster

Tetracycline und deren Resistenzmechanismen

1. Struktur von Tetracyclinen

Nach Cephalosporinen und Penicillien sind Tetracyclin derzeit die meistgebrauchten Antibiotika. Tetracyclin war die erste Hauptgruppe von Antibiotika, zu den der Ausdruck "Breitspektrum"-Antibiotikum gebraucht wurde.

Die aus vier Streptomyces-Arten (deren Stoffwechselprodukte) isolierten Antibiotika der Tetracyclin-Gruppe:

a) Tetracyclin

b) Chlortetracyclin

c) Oxytetracyclin

d) Demeclocyclin

sowie deren partialsynthetisch gewonnenen Derivate

e) Doxycyclin und

f) Minocyclin

besitzen ein gemeinsames Grundgerüst aus vier annelierten Sechsringen (polyzyklisches Naphthacen) und unterscheiden sich in ihrer chemischen Struktur nur durch verschiedene Substituenten an C5, C6 und C7.

Das erste Tetracyclin (Chlortetracyclin, auch im medizinischen als Aureomycin genannt) wurde 1947/48 aus Streptomyces aureofiens isoliert. Zwei Jahre später folgte das Oxytetracyclin (Terramycin) und das Tetracyclin. Doxycyclin wurde im Jahre 1966 und Minocyclin 1972 eingeführt.

Tetracycline verteilen sich im gesamten Organismus und reichern sich in tiefen Kompartimenten wie Knochen und Zähnen an. Sie bilden Tetracyclin-Metall-Chelate.

2. Wirkungsspektrum

Tetracycline wirken bakteriostatisch (hemmen nicht abtöten!) auf grampositive (Streptokokken, incl. Pneumokokken) und zahlreiche gramnegative Bakterien (Neisseien, Francisella, Haemophilus,...) sowie Spirochäten (Borrelien, Treponemen). Klinisch relevant ist insbesondere ihre Wirkung gegen intrazelluläre Keime (z.B. Mykoplasmen).

Die Empfindlichkeit verschiedener Erreger ist dabei verschieden.

Mykobakterien weisen dabei meist nur eine geringe Empfindlichkeit gegen Tetracycline auf, so dass Tetracycline bei der Tuberkulosebehandlung allenfalls als Reserveantibiotika gelten können.

3. Wirkungsmechanismus

Tetracycline sind Hemmstoffe der Proteinbiosynthese (Inhibitoren). Sie binden an die kleine (30S) Ribosomen-Untereinheit des 70S-Ribosoms der Prokaryonten und verhindern die Anlagerung des Aminoacyl-tRNA-Komplexes an die ribosomale Akzeptorstelle (A-Site). Dies führt zur Hemmung der Elongation wachsender Peptidketten. Daneben bewirken Tetracycline eine Hemmung der Zellwand-Biosynthese.

Sobald das Tetracyclin an das Ribosom bindet ändert sich die chemische Reaktivität innerhalb des Ribosoms, so dass es nicht weiterhin Aminoacyl-tRNA aufnehmen kann (Funktion eines Inhibitors).

T. sind vom Wirkungsmechanismus her relativ wenig toxisch für Säugetiere, da ihre Affinität zur Hemmung der bakteriellen Proteinbiosynthese höher ist als die zu entsprechenden Reaktionen eukaryontischer Zellen.

Mit Ausnahme von Minocyclin besteht innerhalb der Tetracycline Kreuzresistenz. Dies bedeutet eine Resistenz gegen zwei oder mehr Antibiotika, die untereinander chemisch verwandt sind und/oder den gleichen Wirkungsmechanismus besitzen. Bei der Gruppe der Tetracyclin beruht dies auf beidseitiger Kreuzresistenz.

4. Resistenzmechanismen

Das große Spektrum der Wirkungen wird allerdings durch das Vorliegen primär resistenter Stämme (bis zu 60%) erheblich eingeengt. Die Entwicklung einer sekundären Resistenz ist selten.

Auf einem Bauernhof vor Boston wurde eine Hälfte der 3-monate alten Küken mit Oxytetracyclin (200g/Tonne Futter) gefüttert. Zwei Befunde waren nach einer Weile offensichtlich: (1) Die Eingeweideflora der Küken wechselte rasch von Tetracyclin-sensitive zu Tetracyclin-resistent, obwohl es keine offensichtlichen Änderungen in den Arten von Bakterien gab. (2) Während fortgesetzter täglicher Tetracyclin-Fütterung schieden die Küken Bakterien aus, die sowohl gegen andere Antibiotika als auch gegen Tetracyclin immun sind. Am Ende der 12. Woche wurden Resistenzen gegen Streptomycin, Sulfonamid, Ampicillin, Carbenicillin und auch Tetracyclin nachgewiesen. Etwa 5 Monate nach Einführung des Antibiotikums auf dem Bauernhof wurde auch eine hohe Anzahl von beständigen fekal-Bakterien bei den etwa 500 Fuß von der Küken-Scheune entfernten Menschen gefunden. Keine dieser Personen nahmen ein Antibiotikum.

Tetracyclin-resistente Bakterien wurden zum ersten Mal 1953 von Shigella dysenteriae isoliert. Seitdem wurden Tetracyclin-resistente Bakterien in einer wachsenden Zahl von Arten und Gattungen gefunden. Dies hat über die Zeit zu reduzierter Wirksamkeit von Tetracyclin-Therapien geführt. Spezifische Tetracyclin-Resistenzgene wurden in 32 Gram-negativen und 22 Gram-positiven Gattungen identifiziert.

Für einen antimikrobiellen Effekt ist eine intrazelluläre Anreicherung von Antibiotika in den Bakterienzellen erforderlich. Diese wird bei resistenten Bakterien durch einen aktiven Auswärtstransport verhindert.

Daneben kann Tetracyclin-Resistenz auf einer Strukturänderung der ribosomalen Bindungsstelle beruhen. Die genetischen Informationen dazu sind auf Resistenzplasmiden (kleine Ringe zusätzlichen Erbmaterials aus doppelsträngiger DNA für Gene) kodiert, die die Resistenz chromosomal und auch extrachromosomal übertragen. Vielfach wird einfach ein Plasmid als Spende von einer Zelle zur anderen weitergegeben.

In anderen Fällen übertragen auch Viren solche Gene. gelegentlich kommt es zudem vor, dass Bakterien sich freigewordenes Erbmaterial von toten, zerfallenden Mikroben einverleiben. Für den zweiten und dritten Mechanismus ist entscheidend, dass das fremde Gen entweder ins Chromosom oder in ein Plasmid fest eingebaut wird. Dies geschieht häufig, weil Resistenzgene oft in Transposons eingebaut sind: kleine DNA-Einheiten, die dazu neigen, auf andere Erbmoleküle zu springen, und sich dort leicht einfügen. Bestimmte Transposons scheinen neue Gene geradezu gierig einzufangen und dann beim Wechsel auf ein anderes Plasmid mit sich zu tragen.

Ein bekanntes Tetracyclin-resistentes Gen ist auf einem zusammengesetzten Transposon (Tn10) codiert. Zusammengesetzte Transposons beinhalten mehrere verschiedene Gene und sind 2000 bis 4000 bp lang. So enthält zum Beispiel der Tn3-Transposon das Resistenzgen für Ampicillin (ampR) und der Tn10-Transposon u.a. ein Resistenzgen für Tetracyclin (tetR).

Jedes dieser Transposons enthält ein Gen, das für eine Transposase codiert, ein Enzym, das die Reaktionen zur Öffnung und Verbindung von DNA durchführt, die für das Springen des Transposons nötig sind. Jedes Transposon trägt auch DNA-Sequenzen (rot), die nur von der von diesem Transposon codierten Transposase erkannt werden und ebenfalls für das Springen nötig sind. Man nimmt an, dass Tn10 dadurch entstanden ist, dass zufällig zwei kleine Transposons auf jeder Seite eines Tetracyclin-Resistenzgens gelandet sind.

iele Tetracyclin-Resistenzen (auch auf Minocyclin und Doxycyclin) von Gram-negativen Bakterien werden oft als Erworben gemeldet. Dies tritt v.a. dann auf, wenn Bakterien auf Plasmide treffen, die ein aktives Abflusssystem codieren, was allerdings nicht bei allen Tetracyclinen funktioniert. Es ist zum Beispiel auch möglich, dass Tetracyclin normal transportiert wird und dann rasch aus dem Bakterium herausgepumpt wird.

5. Indikationen

Die Anwendbarkeit der Tetracycline - vor allem in der Klinik - hat aufgrund der Resistenzzunahme bei zahlreichen Bakterienstämmen abgenommen, doch sind sie noch immer Mittel der Wahl zur Behandlung intrazellulärer Infektionen. Tetracycline sind säurestabil und können daher oral verabreicht werden. Sie sind indiziert zur Therapie von akuten Schüben chronischer Bronchitiden (häufige Beteiligung von ß-Lactamasebildern) sowie bestimmten Hautkrankheiten (z.B. Akne, Rosacea).

Darüber hinaus sind T. eine Alternative, wenn Penicilline aus verschiedenen Gründen (Resistenz, Unverträglichkeit) nicht verordnet werden können. Wegen irreversiblen Veränderungen der Zähne und eventueller Störungen des Längenwachstums sollen Tetracycline während der Schwangerschaft sowie Kindern bis zum 8. Lebensjahr nicht gegeben werden. Dies beruht darauf, dass Tetracycline mit Ca++ Chelate bilden können. Sie überqueren jedoch die Blutgehirnbarriere nicht, so dass sie nicht verwendet werden können, um Meningitis zu behandeln.

Neben der human- und veterinärmedizinschen Anwendung werden v.a. Chlortetracyclin und Oxytetracyclin immer noch in vielen Ländern in großem Umfang als nutritive Antibiotika in der geflügel- und Schweinezucht eingesetzt, in einigen Ländern außerdem zur Konservierung von Fisch, Fleisch und Geflügel. Wegen der Resistenz- und Rückstandsproblematik ist der Einsatz für diese Zwecke in der BRD verboten.

Quellennachweis

FEMS Microbiology Reviews 19 (1996)

Antibiotics I - Mechanism of Action, David Gottlieb und Paul D. Shaw, Springer Verlag

Antibiotic Resistance Genes: Ecology, Transfer and Expression, Cold Spring Harbor Laboratory, 1986

Arzneimittelwirkungen; Ernst Mutschler; Wissenschaftl. Verlagsgesellschaft mbH Stuttgart (4. und 7. Auflage)

Pharmakologie und Toxikologie; Oberdisse, Hackenthal und Kuschinsky; Springer-Verlag

Spektrum der Wissenschaft, Mai 1998 und Juli 1997

Microbiology - Essentials and Applications; Larry Mc/Kane/Judy Kandel; 2.Edition, 1996

Lehrbuch der molekularen Zellbiologie; B. Alberts et al.; Wiley-VCH, Weinheim 1999

RÖMPP Chemie Lexikon