Im vorliegenden Versuch wird die Klonierung des Hefe-Gens sba1 erzielt. Der Bericht protokolliert den Versuchsaufbau, Materielien, Methoden und die Ergebnisse.
Aus dem Inhalt:
I)Versuch: Klonierung eines Hefe-Gens;
Einleitung;
Materialien und Methoden;
Ergebnisse;
Diskussion;
II)Versuch: Ortsspezifische Mutagenese;
Einleitung;
Materialien und Methoden;
Ergebnisse;
Diskussion
Inhaltsverzeichnis
- I) Versuch: Klonierung eines Hefe-Gens
- Einleitung
- Materialien und Methoden
- Ergebnisse
- Diskussion
- II) Versuch: Ortsspezifische Mutagenese
- Einleitung
- Materialien und Methoden
- Ergebnisse
- Diskussion
- Literatur
Zielsetzung und Themenschwerpunkte
Das Praktikumsprotokoll beschreibt die Durchführung und Auswertung von zwei Versuchen im Bereich der mikrobiellen Gentechnologie: die Klonierung eines Hefe-Gens und die ortsspezifische Mutagenese. Ziel des Praktikums ist es, die grundlegenden molekularbiologischen Methoden und Techniken zur Manipulation von DNA zu erlernen und anzuwenden.
- Klonierung eines Hefe-Gens
- Ortsspezifische Mutagenese
- PCR-basierte Methoden
- Restriktionsverdau und Ligation
- Transformation und Selektion
Zusammenfassung der Kapitel
I) Versuch: Klonierung eines Hefe-Gens
Der erste Versuch befasst sich mit der Klonierung des Hefe-Gens sbal. Die Durchführung umfasst die Präparation von genomischer DNA aus Hefe, die PCR-Amplifikation des sbal-Gens, die Restriktionsverdau der PCR-Produkte und des Vektors, die Ligation des Inserts in den Vektor und die Transformation von kompetenten E. coli-Zellen. Die Ergebnisse werden anhand von Agarosegelelektrophorese und Transformationsraten analysiert. Die Diskussion beleuchtet die einzelnen Schritte der Klonierung und die Interpretation der Ergebnisse.
II) Versuch: Ortsspezifische Mutagenese
Der zweite Versuch behandelt die ortsspezifische Mutagenese eines Zielgens. Die Methode beinhaltet die PCR-Amplifikation des Zielgens mit mutagenen Primern, die Restriktionsverdau der PCR-Produkte und des Vektors, die Ligation des mutierten Inserts in den Vektor und die Transformation von kompetenten E. coli-Zellen. Die Ergebnisse werden anhand von Sequenzierungsanalysen und funktionellen Tests ausgewertet. Die Diskussion beleuchtet die Bedeutung der ortsspezifischen Mutagenese und die Interpretation der Ergebnisse.
Schlüsselwörter
Die Schlüsselwörter und Schwerpunktthemen des Textes umfassen die Klonierung, die ortsspezifische Mutagenese, die PCR, die Restriktionsenzyme, die Ligation, die Transformation, die Agarosegelelektrophorese, die Sequenzierung und die mikrobielle Gentechnologie. Das Praktikumsprotokoll beleuchtet die Anwendung dieser Methoden und Techniken zur Manipulation von DNA und zur Untersuchung von Genfunktionen.
- Quote paper
- Student Arlie Zegarra Pumapillo (Author), 2008, Klonierung des Hefe-Gens sba 1. Praktikumsbericht mikrobielle Gentechnologie, Munich, GRIN Verlag, https://www.grin.com/document/114072
