In dem durchgeführten Praktikum geht es um die Überprüfung einer Umklonierung des deutschen cDNA-Humangenomprojektes. Dabei stammen die 5 zu überprüfenden Klone aus einem Biologisch-Medizinischen Forschungszentrums (BMFZ) der Universität Düsseldorf, welches Teil des deutschen cDNA-Konsortiums war. Ziel des Projektes ist die Identifizierung und Analyse der menschlichen cDNA.
Inhaltsverzeichnis
- Zusammenfassung / Abstract
- Zusammenfassung
- Abstract
- Einleitung
- Humangenomprojekt (HUGO)
- Deutsches cDNA-Humangenomprojekt
- Gateway-Cloning
- Aufgabenstellung
- Material und Methoden
- Material
- Geräte
- Kits
- Chemikalien
- Methoden
- Plasmid-Präparation
- Qualitätskontrolle
- Polymerase Chain Reaction (PCR)
- Restriktionsverdau
- Agarose-Gelelektrophorese
- Ergebnisse
- Plasmid-Präparation und Qualitätskontrolle
- Gelelektrophoretische Analyse der PCR und des Restriktionsverdaus
- Diskussion
- Plasmid-Präparation
- Analyse der Umklonierung
- Ausblick
- Literaturverzeichnis
- Anhang
Zielsetzung und Themenschwerpunkte
Der Zweck dieses Praktikums liegt in der Überprüfung einer Umklonierung von fünf Klonpaaren im Rahmen des deutschen cDNA-Humangenomprojekts. Das Projekt befasst sich mit der Identifizierung und Analyse menschlicher cDNA, die in Vektoren eingebaut und in Bakterien transformiert wird. Die Umklonierung dieser cDNA in andere Vektoren, beispielsweise Expressionsvektoren, erfolgt mittels Gateway-Cloning.
- Überprüfung der Umklonierung von fünf Klonpaaren aus dem deutschen cDNA-Humangenomprojekt.
- Anwendung der Gateway-Cloning-Methode zur effizienten Umklonierung von cDNA-Fragmenten.
- Analyse der cDNA-Fragmente mittels PCR und Restriktionsverdau.
- Evaluierung der Erfolgsrate der Umklonierung für jedes Klonpaar.
- Diskussion der Ergebnisse und möglicher Fehlerquellen.
Zusammenfassung der Kapitel
Die Einleitung liefert einen Kontext für das Praktikum, indem sie das Humangenomprojekt, das deutsche cDNA-Humangenomprojekt und die Gateway-Cloning-Methode erläutert. Die Kapitel „Material und Methoden“ detaillieren die verwendeten Materialien und Methoden, einschließlich der Plasmid-Präparation, der Qualitätskontrolle, der PCR, des Restriktionsverdaus und der Agarose-Gelelektrophorese. Die Ergebnisse präsentieren die Ergebnisse der Plasmid-Präparation, der Qualitätskontrolle und der gelelektrophoretischen Analyse der PCR und des Restriktionsverdaus. Die Diskussion analysiert die Ergebnisse der Umklonierung, identifiziert mögliche Fehlerquellen und bietet einen Ausblick auf weitere Schritte.
Schlüsselwörter
Die zentralen Themen des Praktikums sind das deutsche cDNA-Humangenomprojekt, die Gateway-Cloning-Methode, die PCR, der Restriktionsverdau, die Agarose-Gelelektrophorese und die Analyse von Klonpaaren.
- Citar trabajo
- Daniel Waschestjuk (Autor), 2018, Identifizierung und Analyse der menschlichen cDNA. Überprüfung einer Umklonierung von 5 Klonpaaren mittels PCR und Restriktion, Múnich, GRIN Verlag, https://www.grin.com/document/1168903
