In dieser Arbeit werden zwei verschiedene Referenzmaterialien für die Bestimmung von Aflatoxin B1 hergestellt und gemessen. Dabei soll besonders auf die Messgenauigkeit und die Probengenauigkeit geachtet werden.
Ungesunde Ernährung kann zu einer erhöhten Anfälligkeit von Krankheiten führen oder zu körperlichen und geistigen Entwicklungsstörungen. Deshalb ist die Qualität von Lebensmitteln ein wichtiger Faktor für die menschliche Gesundheit. Schon bei der Primärproduktion beginnt die Produktion eines qualitativ hochwertigen und sicheren Lebensmittels. Entlang der Wertschöpfungskette (Wachstum, Verarbeitung, Lagerung und Transport) entwickeln sich je nach Temperatur, Feuchtigkeit und Gasgehalt der Luft Schimmelpilze und Toxine. Da vor allem Getreide häufig mit den gesundheitsgefährdenden Mykotoxinen belastet sein kann, sind Sicherheitskontrollen hier sehr wichtig. Es gibt heute mehrere Nachweisverfahren für Mykotoxine. Ein Nachteil dieser Verfahren ist, dass sie meist sehr zeit- und kostenintensiv sind.
Inhaltsverzeichnis
1 EINLEITUNG
2 ZIELSTELLUNG
3 AFLATOXINE
4 MATERIAL
4.1 MATERIALIEN UND GERÄTE
4.2 CHEMIKALIEN
5 METHODEN
5.1 PIPETTENÜBERPRÜFUNG
5.1.1 Pipettenüberprüfung der Eppendorf Reference 3291751 (500 – 2500 μL)
5.1.2 Pipettenüberprüfung der Eppendorf Research 3253831 (0,5 -10 μL)
5.2 ÜBERPRÜFUNG DER PIPETTIERGENAUIGKEIT DER LIQUID HANDLING WORKSTATION
5.2.1 Test Schlauchpumpe
5.2.2 Test Kolbenpumpe
5.3 ERSTELLUNG EINER KALIBRIERUNG FÜR AFLA B1
5.4 HERSTELLUNG UND MESSUNG VON REFERENZMATERIAL
6 ERGEBNISSE UND DISKUSSION
6.1 PIPETTENÜBERPRÜFUNG DER EPPENDORF REFERENCE 3291751 (500 – 2500 μL)
6.2 PIPETTENÜBERPRÜFUNG DER EPPENDORF RESEARCH 3253831 (0,5 -10 μL)
6.3 ÜBERPRÜFUNG DER PIPETTIERGENAUIGKEIT DER LIQUID HANDLING WORKSTATION
6.4 ERSTELLUNG EINER KALIBRIERUNG
6.5 BESTIMMUNG DER AFLATOXINKONZENTRATION
Zielsetzung & Themen
Das primäre Ziel dieser Arbeit ist die Herstellung und messtechnische Validierung zweier verschiedener Referenzmaterialien zur quantitativen Bestimmung von Aflatoxin B1. Dabei soll untersucht werden, ob die erreichte Messgenauigkeit den Anforderungen entspricht oder ob die Probenvorbereitung optimiert werden muss.
- Überprüfung der Pipettiergenauigkeit diverser Laborgeräte
- Funktionskontrolle einer Liquid Handling Workstation
- Etablierung eines Fluoreszenz-Polarisations-Immunoassay (FPIA)
- Berechnung und Durchführung der Probenvorbereitung von Getreide (Mais und Weizen)
- Statistische Auswertung und Diskussion der Messergebnisse
Auszug aus dem Buch
5.1.1 Pipettenüberprüfung der Eppendorf Reference 3291751 (500 – 2500 μL)
Bei der Eppendorf Reference 3291751 (500 μL – 2500 μL) wurde zuerst das Volumen auf 500 μL eingestellt. Die Pipettenspitze wurde aufgesteckt und anschließend wenige Millimeter in die Prüfflüssigkeit getaucht. Das zu überprüfende Volumen wurde langsam und gleichmäßig aufgenommen und anschließend an der Gefäßwand abstreifend, aus der Flüssigkeit gezogen. Die Prüfflüssigkeit wurde bis zum ersten Messhub, in das leere Becherglas abgegeben und danach bis zum Überhub durchgedrückt um die Restflüssigkeit abzugeben. Der Wiegewert wurde notiert und der Vorgang anschließend 9 wiederholt. Mit den gemessenen Werten wurden anschließend der Mittelwert, die Standardabweichung und der Variationskoeffzient ermittelt. Der gesamte Vorgang wurde mit 1500 μL und 2500 μL wiederholt.
Zusammenfassung der Kapitel
1 EINLEITUNG: Es wird die Relevanz von Mykotoxin-Sicherheitskontrollen bei Getreide sowie die theoretische Funktionsweise des Fluoreszenz-Polarisations-Immunoassay (FPIA) beschrieben.
2 ZIELSTELLUNG: Definiert die Herstellung und Messung von Referenzmaterialien für Aflatoxin B1 sowie die Validierung der Messgenauigkeit.
3 AFLATOXINE: Beschreibt die Eigenschaften, Vorkommen und toxikologischen Gefahren von Aflatoxinen, insbesondere Aflatoxin B1.
4 MATERIAL: Listet sämtliche für die Versuche verwendeten Geräte, Reagenzien und Probenmaterialien detailliert auf.
5 METHODEN: Erläutert die Vorgehensweisen bei der Pipettenprüfung, dem Test der Liquid Handling Workstation sowie der Kalibrierung und Probenvorbereitung.
6 ERGEBNISSE UND DISKUSSION: Präsentiert und bewertet die experimentellen Daten der Pipettenprüfungen, der Pumpentests sowie die Ergebnisse der Aflatoxin-Bestimmung in Mais- und Weizenproben.
Schlüsselwörter
Aflatoxin B1, Fluoreszenz-Polarisations-Immunoassay, FPIA, Liquid Handling Workstation, Pipettenprüfung, Mykotoxine, Analytik, Lebensmittelkontrolle, Kalibrierung, Validierung, Referenzmaterial, Laborautomatisierung, Statistik, Messgenauigkeit, Getreideanalyse.
Häufig gestellte Fragen
Worum geht es in dieser wissenschaftlichen Arbeit?
Die Arbeit beschäftigt sich mit der Qualitätssicherung im Labor durch die Überprüfung von Pipettiergeräten und einer Liquid Handling Workstation sowie der Validierung eines Analyseverfahrens für Mykotoxine.
Welche zentralen Themenfelder werden behandelt?
Die Schwerpunkte liegen auf der instrumentellen Analytik, der statistischen Qualitätskontrolle von Dosiersystemen und der quantitativen Bestimmung von Aflatoxin B1 in Getreideproben.
Was ist das primäre Ziel der Untersuchung?
Ziel ist es, Referenzmaterialien herzustellen und zu messen, um zu beurteilen, ob die angewandte Probenvorbereitung und das Messverfahren eine ausreichend hohe Genauigkeit gewährleisten.
Welche wissenschaftliche Methode kommt zum Einsatz?
Es wird der Fluoreszenz-Polarisations-Immunoassay (FPIA) verwendet, wobei die Konzentration des Antigens photometrisch über die Verdrängung eines fluoreszenzmarkierten Antigens bestimmt wird.
Was wird im Hauptteil der Arbeit behandelt?
Der Hauptteil gliedert sich in die detaillierte Methodenbeschreibung für die Kalibrierung und Pipettenprüfung sowie die darauffolgende tabellarische Auswertung und Diskussion der ermittelten Messwerte.
Welche Schlüsselwörter charakterisieren die Arbeit?
Die Arbeit lässt sich am besten durch Begriffe wie Aflatoxin B1, FPIA, Pipettenprüfung, Validierung und Laborautomation beschreiben.
Warum ist die Überprüfung der Liquid Handling Workstation so wichtig?
Die regelmäßige Überprüfung ist essenziell, um die Präzision und Richtigkeit der automatisierten Analysenschritte sicherzustellen und somit verlässliche Ergebnisse zu garantieren.
Was bedeuten die Abweichungen bei der Weizenprobe?
Die Abweichungen bei der Weizenprobe könnten auf ein Matrixproblem zurückzuführen sein oder auf Fehler bei der Probenvorbereitung, was im Vergleich mit anderen Laboren noch genauer untersucht werden müsste.
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- Alexandra Steinbach (Author), 2017, Nachweis von Aflatoxinen mittels eines Fluoreszenz-Polarisations-Immunoassays, Munich, GRIN Verlag, https://www.grin.com/document/376262
